以下是提高島津液相色譜柱使用壽命的方法：
一、使用前的準(zhǔn)備與活化
1.仔細(xì)閱讀說明書并選擇合適色譜柱：在使用前認(rèn)真研讀色譜柱的說明書，充分了解其種類、特性及適用范圍。依據(jù)所分析樣品的極性大小、化合物的種類數(shù)量、結(jié)構(gòu)特征等因素，精準(zhǔn)選用與之匹配的色譜柱。例如分析極性較大的多糖類成分時，應(yīng)采用親水性的反相填料。對于使用的色譜柱，按照廠家的出廠說明進行低流速的沖洗活化操作，此舉可增強色譜填料的共價鍵鍵合力，進而提高柱效并延長壽命。
2.做好樣品預(yù)處理
制樣溶劑選擇：制樣溶劑需綜合考慮樣品的溶解性、與流動相的相溶性以及色譜填料的適用性。應(yīng)挑選對樣品有較大溶解性且與流動相混溶的溶劑，同時洗脫強度最好低于流動相或梯度洗脫中的起始流動相，以免影響樣品分離。許多手性色譜柱禁止使用DMSO、四氫呋喃、氯仿等溶劑，因為這些溶劑會破壞固定相的結(jié)構(gòu)，縮短色譜柱使用壽命。此外，制樣溶劑還需與色譜系統(tǒng)其他部件如高壓泵、進樣器等相適配。
制樣溶劑過濾：在進樣前，使用0.22μm的微孔濾膜對樣品溶液進行過濾，除去不溶性微粒，防止堵塞柱頭濾片及柱內(nèi)填充床。若條件允許，最好采用與色譜柱同種填料的固相萃取柱過濾進樣溶液，這樣可以減少在色譜柱上死吸附的物質(zhì)或易堵塞的大分子樣品。比如生物樣品中的小極性的油脂類物質(zhì)易于沉淀死吸附在C18反相色譜柱中，導(dǎo)致柱效降低、柱壓升高，而采用SPE柱過濾后，可有效減少此類情況發(fā)生，保護色譜柱不被污染。
控制溶液濃度和進樣量：避免過高的樣品負(fù)荷，防止樣品在柱子表面大量殘留，從而延長柱子的使用壽命。強酸、強堿性物質(zhì)和蛋白質(zhì)類生物大分子等能與固定相填料作用，或生成不可逆吸附層，改變填料表面特征，使色譜柱性能發(fā)生變化，最終導(dǎo)致分離失效，因此要特別注意這類物質(zhì)的進樣量。
1.優(yōu)化流動相選擇與處理
流動相兼容性：所選用的流動相應(yīng)與色譜柱、待分析樣品相兼容，即樣品、樣品溶液和流動相互溶，且不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。色譜分析應(yīng)優(yōu)先選擇色譜級的流動相，因為分析純的溶劑含有微量雜質(zhì)，大量使用后會引起色譜柱性能變化。建議使用色譜純級或者更高純度的試劑，以降低溶劑中雜質(zhì)帶來的損傷。
流動相過濾與脫氣：使用色譜純試劑配制流動相后，在使用前需經(jīng)0.45μm或者更小孔徑的濾膜過濾和超聲脫氣處理，減少灰塵、微生物等雜質(zhì)堵塞色譜柱，尤其是水溶性流動相易引起微生物生長而造成色譜柱阻塞。流動相最好是現(xiàn)配現(xiàn)用，放置時間最好不要超過2天。
控制流動相pH值和緩沖鹽使用：極*pH的流動相會破壞填料內(nèi)的共價鍵，“溶解”硅膠，使固定相流失，從而降低柱效，縮短使用壽命。以硅膠作基質(zhì)的固定相一般要求pH在2.5~7范圍內(nèi)使用。長期在pH>7或pH<2的環(huán)境中，硅膠會逐漸溶解或者表面鍵合的官能團會逐漸流失。如果必須使用高或低pH的流動相，應(yīng)選用相適應(yīng)的色譜填料。
合理控制流速：不同粒徑的色譜柱有對應(yīng)的推薦流速范圍。
2.正確操作儀器：每次開機使用分析儀器時，避免泵啟動過快導(dǎo)致流速和柱壓瞬間升高，使柱床受到?jīng)_擊而引起紊亂，產(chǎn)生空隙。在操作實驗開始時，應(yīng)當(dāng)將流速和柱壓逐漸增加，給予色譜柱一個緩沖適應(yīng)的過程。
3.使用保護柱：“保護柱”是與所使用液相色譜柱相同填料的短型色譜柱，它可以有效地阻攔容易損壞色譜柱的大分子和不溶性顆粒，過濾易沉著色譜柱上產(chǎn)生死吸附的物質(zhì)，從而延長主分析柱的壽命。
4.控制柱溫：不同類型的色譜柱耐受的溫度各有差別。通常色譜柱溫維持在10～40℃之間，能夠充分、優(yōu)地發(fā)揮色譜柱的性能。超出色譜柱溫度范圍，尤其高于柱溫范圍，會增加對流動相中化學(xué)物質(zhì)的吸附，引起色譜柱固定相結(jié)構(gòu)的改變；此外，還可能引起柱床塌陷，改變峰形，降低柱效，產(chǎn)生不可逆性的損傷。
